當(dāng)前位置：BEL-7402人肝癌細(xì)胞操作步驟
點(diǎn)擊次數(shù)：33 更新時(shí)間：2025-07-24
在完成BEL-7402人肝癌細(xì)胞的復(fù)蘇和傳代后，下一步需進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的日常觀察與換液操作。首先，將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下，觀察細(xì)胞的生長狀態(tài)及密度。健康的BEL-7402細(xì)胞通常呈多邊形或梭形，貼壁生長，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)異常(如變圓、脫落或出現(xiàn)空泡)，可能提示污染或培養(yǎng)條件不佳，需及時(shí)處理。
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)，即可進(jìn)行換液。換液前需預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清的DMEM)至37℃，隨后在超凈工作臺(tái)中棄去舊培養(yǎng)基，用預(yù)熱的PBS輕柔洗滌細(xì)胞2次，以去除代謝廢物和死細(xì)胞。注意避免直接沖擊細(xì)胞層，防止細(xì)胞脫落。洗滌后，加入新鮮培養(yǎng)基，體積以覆蓋瓶底為宜(如T25培養(yǎng)瓶加入5-6mL)。
若需進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)(如藥物處理或轉(zhuǎn)染)，建議在換液后24小時(shí)內(nèi)操作，此時(shí)細(xì)胞處于對數(shù)生長期，狀態(tài)最佳。對于長期培養(yǎng)，需每隔2-3天換液一次，并定期傳代以維持細(xì)胞活性。每次操作后，需詳細(xì)記錄細(xì)胞狀態(tài)、傳代次數(shù)及實(shí)驗(yàn)條件，以確保實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。
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